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二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)試劑盒說明書

簡要描述:

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更新時間:2022-01-27

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二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)試劑盒說明書

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)試劑盒說明書

紫外分光光度法 紫外分光光度法 微板法 微板法

24樣 48樣 48樣 96樣

AS231

 

試劑組成和配制

提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體×5 瓶,-20℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加入4.5mL試劑二充分混勻。(3天使用完)

1.png 

樣品處理

1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g 離心 5min,取全部上清于 4℃、100000g離心30min,棄上清,取沉淀溶于 1mL 試劑一。

2. 細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后于4℃,10000g 離心5min,取全部上清于4℃、100000g 離心30min,棄上清,取沉淀溶于1mL試劑一。

3. 血清:直接測定。

優(yōu)點如下:

1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;

2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;

3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;

4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;

5、回收試驗: X =99%;

6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強;

7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。

測定步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

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